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Hallo Lene

> Max und Moritz haben Geld geklaut. Ersterer kriegt Skrupel,
> wird von Zweiterem gekillt – und jagt fortan im Jenseits
> untote Seelen.

> Heißt es: Ersterer kriegt Skrupel und wird von Zweiterem
> gekillt oder Ersterer kriegt Skrupel und wird vom
> Zweiteren gekillt? Wo gehört die Dativendung hin und warum?
> (Ich tendiere zu Option Nummer 1.)

Gibt es das Wort „Zweiterer“ überhaupt?

https://www.korrekturen.de/forum.pl/md/read/id/12446/sbj/zweiteres/

Dein erstes Beispiel ist ohne bestimmten Artikel (der, die, das), das zweite mit.

Ersterer kriegt Skrupel und wird von Letzterem gekillt.

Der Erste kriegt Skrupel und wird vom (vo[n de]m) Zweiten gekillt.

Gruß

Pumene

Zur Erklärung Deines „spannenden Problems“:

Bei Adjektiven gibt es in der deutschen Sprache die starke, die schwache und die gemischte Deklination.

https://de.wikipedia.org/wiki/Deutsche_Deklination#Adjektive.2C_Pronomen_und_Artikel

die starke, wenn das Adjektiv allein steht, die schwache, wenn der bestimmte Artikel (der, die das) davor steht und die gemischte (die für Dein nachgefragtes Beispiel nicht relevant ist), wenn der unbestimmte Artikel (ein, eine, ein) davor steht.

Da ich „zweiterer“ nicht kenne, wähle ich ein anderes Beispiel.

Dativ Singular Maskulinum, stark:

Letzterem

Dativ Singular Maskulinum, schwach:

dem Letzteren

Im ersten Falle taucht das den Dativ-Singular-Maskulinum (oder Neutrum) anzeigende typische m am Schluss des Adjektivs selbst auf, im zweiten Fall dagegen im bestimmten Artikel „dem“.

Dieses gilt natürlich auch für substantivierte Adjektive (Ersterer, der Erstere).

Präpositionen wie „von“ können in der deutschen Sprache mit dem bestimmten Artikel zu einem einheitlichen Wort verschmelzen.

www.duden.de/rechtschreibung/vom

Grammatik: Präposition+Artikel

vom = von + dem --> vo[n + de]m --> vom

Da Du in Deinem Beispielsatz „Ersterer“ als starkes substantiviertes Adjektiv (ohne bestimmten Artikel) benutzt hast, würde ich den Satz für „Letzterer“ in Analogie dazu „von Letzterem“ fortsetzen.
Wenn Du statt Deines Beispielsatzes das schwache substantivierte „Der Erstere“ benutzt hättest, würde ich den Satz in Analogie dazu für „der Letztere“ mit „vom Letzteren“ fortsetzen.

Soweit die Erklärung.